目的:以原位肝癌(hepatocellular carcinoma

HCC)小鼠为模型

观察电针对肝癌小鼠转轮活动节律的调节作用及其对视交叉上核(suprachiasmatic nucleus

SCN)内表观遗传学相关基因表达的影响

探讨电针调整肝癌患者昼夜节律的表观遗传学机制。方法:将筛选合格的108只雄性C57BL/6J小鼠按6个授时因子时间(zeitbeger time

ZT)即ZT0(7:00)、ZT4(11:00)、ZT8(15:00)、ZT12(19:00)、ZT16(23:00)和ZT20(3:00)实施干预

每个时间点设空白组、模型组和电针组

每组6只。肝脏注射H22癌细胞悬液制备肝癌小鼠模型。造模后第11天开始干预

电针组在各相应时间点给予电针小鼠"肝俞"和"至阳"穴(电针参数:2 Hz/15 Hz

0.2 m A)

每天1次

每次15 min

连续电针10 d。空白组和模型组在同时间、同等条件下捆绑固定。全程采用Clock Lab(ACT-500)软件不间断记录小鼠活动节律

干预10 d后采用MATLAB(R2007b)导出小鼠转轮活动节律图谱

分析小鼠活动振幅与峰相位。选择最佳时间点干预组

采用高通量表观遗传学PCRarray阵列检测小鼠SCN部表观遗传学相关基因表达。结果:(1)造模后

与对应时间点空白组比较

模型组和电针组小鼠活动振幅下降、峰相位滞后(均P<0.05)

模型组与电针组节律参数比较差异无统计学意义(均P>0.05);(2)干预后

与ZT8模型组比较

ZT8电针组小鼠活动振幅升高、峰相位前移(均P<0.05)

ZT0、ZT4、ZT12、ZT16、ZT20电针组与相应时间点模型组比较活动振幅、峰相位差异无统计学意义(均P>0.05);ZT8电针组与ZT0、ZT4、ZT12、ZT16、ZT20电针组比较

活动振幅升高、峰相位前移(均P<0.05);(3)表观遗传PCRarray阵列(Epigenetic PCRarray)结果示:最佳时间点ZT8干预结束后

与空白组比较

肝癌小鼠SCN内48个表观遗传学相关基因表达上调;与模型组比较

电针下调SCN内49个表观遗传学相关基因相对表达量;3组小鼠SCN内表观遗传学相关差异表达基因有23个。结论:电针能够对肝癌小鼠转轮活动节律产生良性调节

且以15:00最佳;该时间点电针能下调肝癌小鼠SCN内异常高表达的表观遗传学相关基因。