目的:观察经穴注射骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合益气活血中药对糖尿病(DM)大鼠缺血后肢骨骼肌毛细血管密度及小动脉密度的影响。方法:80只SD大鼠按1∶7比例随机分为2组:正常假手术组10只

其余70只一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ

50.0 mg/kg)制成DM大鼠模型

再等比例随机分为7组

即DM假手术组、DM缺血组、中药组(益气活血中药灌胃)、局部注射组(局部注射BMSCs)、局部注射+中药组(局部注射BMSCs配合益气活血中药灌胃)、穴位注射组(穴位注射BMSCs)、穴位注射+中药组(穴位注射BMSCs配合益气活血中药灌胃)

每组10只。局部注射组、局部注射+中药组取缺血组织与正常组织交界处等距离选取5个点为注射部位注射BMSCs

注射量及浓度同穴位注射组。穴位注射:穴取"三阴交""照海""环跳""后三里""阳陵泉"

每只大鼠共注射100μL浓度为1×107/m L的BMSCs

每处注射20μL。灌胃中药为煎煮浓缩成含生药1.5 kg/L的益气活血中药(生黄芪120 g、党参120 g、炙甘草48 g、当归120 g、鸡血藤120 g、川牛膝48 g)。非中药组蒸馏水灌胃。应用免疫组织化学SP二步法检测大鼠骨骼肌中α-平滑肌肌动蛋白(α-actin)、血小板内皮细胞黏附分子CD31、血管性血友病因子(v WF)的表达。结果:干预结束后21 d

各组内术侧较健侧后肢α-actin、CD31(除中药组外)表达均有所升高(P<0.05

P<0.01);中药组、局部注射组、局部注射+中药组、穴位注射+中药组术侧与健侧比较

v WF表达均降低(P<0.05

P<0.01)。术侧组间比较

穴位注射+中药组与正常假手术组、DM假手术组、DM缺血组、局部注射组比较

骨骼肌中α-actin表达明显升高(P<0.05

P<0.01);穴位注射组、穴位注射+中药组、局部注射+中药组大鼠后肢骨骼肌CD31表达与正常假手术组、DM假手术组、DM缺血组比较明显升高(P<0.05

P<0.01);穴位注射+中药组较中药组和局部注射组CD31表达升高(均P<0.05);局部注射+中药注射组、穴位注射组、穴位注射+中药组与DM假手术组、DM缺血组比较

v WF表达降低(P<0.05

P<0.01)。结论:缺血可促进血管密度相关因子α-actin、CD31表达

但若给予穴位注射BMSCs或益气活血中药、特别是穴位注射BMSCs结合益气活血中药干预可明显促进血管密度相关因子α-actin、CD31的表达

抑制v WF的表达。说明穴位注射BMSCs结合益气活血中药可促进缺血组织血管新生

对改善组织缺血有促进作用。